Сучасні вакцини проти сказу тварин
Одним з основних і ефективних способів запобігання сказу є своєчасна і ефективна імунопрофілактика, заснована на використанні антирабічних вакцин [Би, 11]. З моменту створення Л. Пастером першої антирабічної вакцини пройшло більше 100 років. За цей час запропоновано, апробовано і впроваджено у ветеринарну практику безліч різних препаратів проти сказу [9, 14].
Використовуючи принципи виготовлення і механізми дії в організмі, усі антирабічні вакцини умовно можна розділити на 4 групи: цельновирионные, субодиничні, рекомбінантні і ДНК-вакцини.
У ветеринарній практиці широкого поширення набули живі і інактивовані цельновирионные вакцини на основі вакцинних штамів вірусу сказ (Paris Pasteur, Pitman - Moore, CVS - 27, Kelev, Flury LEP і HEP, SAD, ERA, Внуково-32, Щелково-51 і ТС-80), який вирощує в первинних (брунька собаки, хом'яка, поросяти) і ВНК, що перевиваються [-21/13, WI - 38 (диплоїдна), CEF, Vero, лінія 4647, MDBK і ПС] лініях клітин [14].
Практично усі антирабічні препарати у світі готують, використовуючи різні поєднання описаних штамів вірусу сказу і культур клітин [3].
З цих двох груп препаратів більшу перевагу віддають інактивованим, оскільки, незважаючи на досягнуті успіхи, застосування живих вакцин в майбутньому може привести до необхідності захисту тварин від масованої агресії модифікованого природою "вакцинного" вірусу сказу [4].
З іншого боку, широке використання інактивованих вакцин стало можливим завдяки успіхам біотехнології, зокрема великомасштабному культивуванню вірусу сказу, в первинних лініях клітин, що перевиваються, що дозволило конструювати і виготовляти високоімуногенні парентеральні препарати.
Нині в Російській Федерації рекомендовано до застосування декілька вітчизняних і зарубіжних вакцин.
Одна з перших вітчизняних розробок - промислова технологія виготовлення сухої інактивованої вакцини з фіксованого вірусу сказу, штам Щелково-51, вирощеного у ВНК-21/13 [6]. У 1976-1991 рр. було виготовлено і успішно випробувано більше 9 млн доз препарату, який при двократній імунізації забезпечував напружений імунітет впродовж 2 років. При цьому на 14-у добу титр вируснейтрализующих антитіл в крові собак перевершував в 17-38 разів мінімальний рівень антитіл, що забезпечують захист тварин від зараження (0,5 МЕ/мл)[4].
Сьогодні Щелковский біокомбінат з штаму Щелково-51 і клітинної системи ВНК-21 випускає: вакцину антирабічну інактивовану суху культуральну вакцину антирабічну інактивовану рідку культуральну (Рабиков) вакцину антирабічну інактивовану суху культуральну для собак і кішок (Рабикан).
У нашому інституті виготовляють антирабічну інактивовану культуральну сорбовану вакцину, що випускається в рідкій і сухій формах. Розроблена технологія дозволяє отримувати матеріал з високою інфекційною (7,5-8,0 Ig МЛД /см3) і антигенною активністю (3-5 ME). Для інактивації використовують теотропин вітчизняного виробництва, який забезпечує щадний режим, не змінюючи конформаційну структуру протективно значущих епітопів глікопротеїну вірусу сказу. Суха і рідка вакцина у собак і кішок створювали напружений антирабічний імунітет, який формувався на 14-21-й день і зберігався впродовж 18 мес, що визначали шляхом контрольного зараження тварин [1].
ВНИИЗЖ випускає рідку і суху форми антирабічної інактивованої культуральної вакцини, виготовленої з штаму Щелково-51, вирощеного в суспензійній культурі клітин ВНК-21/17, інактивованого аминоэтилэти-ленимином. Сорбирована вона на гідроокисі алюмінію.
Для імунізації собак і кішок в Экспериментально-производственном підприємстві по виробництву бактерійних і вірусних препаратів Інституту поліомієліту і вірусного енцефаліту ім. М. П. Чумакова РАМН розроблена антирабічна культуральна концентрована очищена інактивована суха вакцина, виготовлена з штаму Внуково-32, вирощеного в культурі клітин бруньок сирійського хом'яка і інактивованого ультрафіолетовими променями [3].
Для вакцинації собак і кішок на території нашої країни використовують зарубіжні антирабічні вакцини: Дефенсор-3 (Пфайзер, США) Nobivac Rabies (Intervet, Голландія) Rabisin (Merial, Франція). Ці препарати з пастерівських штамів вірусу сказу, інактивованого бета-пропилактоном, забезпечують формування імунітету після двократної вакцинації впродовж 3-5 років [3].
Окрім антирабічних моновакцин застосовують комбіновані мультивалентні препарати проти різних збудників інфекційних хвороб, що веде до розширення стратегій імунопрофілактики і значно спрощує календар щеплень. Ці вакцини використовують для імунізації собак і кішок. Так в антирабічну вакцину для собак включені антигени збудників чуми і гепатиту собак, лептоспірозу і парвовироза м'ясоїдних, а в комбіновані антирабічні вакцини для кішок - антигени вірусу панлейкопении кішок, калицивируса і парвовіруса котячих. Встановлена висока імуногенна потенція вакцини проти парвовирусного ентерита і чуми собак, що містить інактивований вірус сказу, штам Щелково-51 [4].
З 1999 р. на території Росії застосовують вітчизняну вакцину проти чуми м'ясоїдних, парвовирусного ентерита, інфекційного гепатиту, аденовироза, лептоспірозу і сказу собак БИОРАБИК.
Наступним типом антирабічних вакцин є субодиничні препарати, які безпечні (не містять вірусу) і вільні від баластних білків [2]. Проте із-за низької імуногенної активності і високої вартості їх використання обмежене.
Успіхи в області клонування і експресії генів привели до створення рекомбінантних вакцин проти сказу, які прості у виготовленні, стійкі в зовнішньому середовищі і індукують напружений імунітет. Застосування рекомбінантного вірусу виключає попадання в зовнішнє середовище потенційно небезпечного генома вакцинного вірусу сказу.
Найбільшого поширення рекомбінантні препарати набули при пероральній вакцинації диких м'ясоїдних. Хоча використання антигенів різних серотипов вірусу сказу дозволяє виготовляти мультивалентні вакцини для парентерального введення. Так, використання вектору, що несе ділянки глікопротеїнів серотипов 1 і 5, дозволило створювати активний імунітет до цих серотипам вірусу сказу [10].
Рекомбінантні вакцини широко застосовують в багатьох країнах світу як екологічно найбільш безпечні для боротьби із сказом диких м'ясоїдних.
Відносно новою віхою рабиологической вакцинологии є розробка ДНК-вакцин, плазмидную ДНК, що є, в яку вбудований ген глікопротеїну вірусу сказу. Переваги цих препаратів : стабільність, висока міра очищення, відсутність баластних білків і контамінації сторонніми агентами і індукція у тварин системного і місцевого імунітету [12, 15]. Двократна внутрішньом'язова вакцинація собак плазмидной ДНК, экспрессирующей глікопротеїн вірусу сказу, захищає тварин від контрольного зараження вірулентним штамом вірусу сказу [12, 13].
Ще однією важливою перевагою ДНК-вакцини є можливість вбудовування в ДНК плазмиды глікопротеїнів декількох лиссавирусов, що дозволяє підвищити міру захисту проти декількох серотипов вірусу сказу [10]. Ефективність імунізації тварин ДНК-вакцинами очевидна, проте знадобиться ще багато зусиль для практичної реалізації нового підходу до профілактики сказу.
Таким чином, незважаючи на різні типи, сучасні вакцини дозволяють формувати напружений імунітет, навіть при одноразовому введенні препаратів (ДНК-вакцина, рекомбінантна і інактивована вакцини) титр антитіл через 540 днів складає не менш порогового рівня (0,5 МЕ/мл)[13].
Одним з найважливіших чинників імунопрофілактики є спосіб ін'єкції антигена, для цього упродовж тривалого часу використовували підшкірний метод введення антирабічних препаратів. Проте ми встановили, що після внутрішньошкірної і підшкірної імунізації мишей і овець інактивованими вакцинами у тварин формувалися антирабічні вируснейтрализующие антитіла з практично ідентичною активністю [7, 8]. Отримані дані підтвердили зв'язок між антигеном, що вводився, і центральною нервовою системою, яка проявлялася посиленням імунної відповіді при ін'єкції антирабічної вакцини в місця, багаті нервовими закінченнями [4].
Нині проблеми імунізації сільськогосподарських тварин зберігаються, тому ми вважаємо актуальним використання внутрішньошкірного введення антигена за допомогою безыгольного ін'єктора, яке дозволить істотно зменшити матеріальні витрати при високій імунологічній ефективності.
Висновок
У розпорядженні ветеринарної практики є різні типи антирабічних препаратів, що забезпечують захист тварин від летальної інфекції, проте найбільшого поширення набули інактивовані вакцини. Вони високоефективні, мають економічно обгрунтовану просту технологію виготовлення. Використання описаних препаратів і внутрішньошкірне їх застосування сприятиме зниженню напруженості епізоотичної ситуації по сказу в Російській Федерації.
ЛІТЕРАТУРА
1. Вишневих медів І. Ф. та ін. // Ветеринарія.
1998. 1.
2. ГрибенчаС. У-//Питання вірусології. 1988. 33, 4.
3. Груздев До. Н. та ін. Сказ тварин. Акваріум. 2001.
4. Іванов В. С. та ін. // Вісник РАСХН. 2000. 2.
5. Комітет експертів ВІЗ по сказу // 8-а доповідь. Женева, ВІЗ. 1994 (СТД 824).
6. Кузнєцов П. П. та ін. Сб. Передовий научно-производ, досвід вбиол, промисловості, 1979, 3.
7. Недосеков В. В. та ін. Мат. междунар. конф. Покров, 2002.
8. Недосеков В. В. Мат. Ill конф. по хворобах домашніх тварин. Персиановка. 2000.
9. Laboratory techniques in rabies 4-th ed. Geneva. 1996.
10. Desmezieres E. et al. // J. Gen. Virol. 1999. 80, 9.
11. Pastoret P. P. //Virus Research. 2002, 82.
12. Perrin P. etal. //Vaccine. 1999, 14, 5-6,
13. Stanley A. etal. // Vaccines. 1999. 14. Sureau P. // Vertrebrate Cell Cult. 1987
The modern vaccines against animal rabies V. V. Nedosekov